微滴式数字PCR平台

　　微滴式数字PCR (Droplet digital PCR, ddPCR) 是近年来发展起来的快速、准确、可实现DNA绝对定量的PCR方法。ddPCR在传统的PCR扩增前对样品进行微滴化处理，即将含有核酸分子的反应体系分成数万个纳升级的微滴，其中每个微滴或不含待检核酸靶分子，或者含有一个至数个待检核酸靶分子。经PCR扩增后，对每个微滴的荧光信号进行逐一分析，有荧光信号的微滴判读为阳性，没有荧光信号的微滴判读为阴性，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。ddPCR是做到真正意义上的绝对定量，数据分析更加客观可靠。与qPCR方法相比，ddPCR兼有qPCR方法的优点，同时提高了检测灵敏度，在复杂异质样品中的稀有序列检测方面具有明显的技术优势。ddPCR的另一个主要优势是所需样本量很低，尤其是当病理样本太少时，这在临床上具有特殊意义。

　　ddPCR技术的引入为麻风患者尤其是少菌型麻风患者检测带来了希望。2021年11月我院接诊1例少菌型麻风患者，该患者qPCR结果阴性，ddPCR检测阳性，成功对患者确诊。此次是ddPCR技术助力少菌型麻风临床诊断的成功案例。